Wiele pasm w pcr

Jedną z prawdopodobnych przyczyn wielu prążków w PCR jest niespecyficzne przyłączanie starterów. ... Zbyt wiele cykli PCR (ponad 30) może również powodować powstawanie wielu prążków ze względu na zwiększone prawdopodobieństwo błędu w każdym cyklu. Innym możliwym czynnikiem jest zanieczyszczenie DNA.

1. Dlaczego w elektroforezie żelowej występuje wiele pasm??
2. Jak rozwiązywać problemy z wieloma pasmami w PCR??
3. Czym są pasma PCR??
4. Dlaczego w RAPD jest wiele pasm??

Dlaczego w elektroforezie żelowej występuje wiele pasm??

Matryca żelowa działa jak sito: mniejsze cząsteczki DNA migrują szybciej niż większe, więc cząsteczki DNA o różnych rozmiarach rozdzielają się na odrębne pasma podczas elektroforezy.

Jak rozwiązywać problemy z wieloma pasmami w PCR??

Popularne odpowiedzi (1)

1. wykonać reakcję z kontrolą ujemną (bez szablonu). ...
2. Zwiększ temperaturę wyżarzania. ...
3. Przeprojektuj podkłady i wydłuż 3′. ...
4. Wydłuż czas wyżarzania, jeśli niespecyficzne produkty są krótsze od docelowego. ...
5. Użyj mniej szablonu DNA.
6. Wypróbuj PCR dotykiem.

Czym są pasma PCR??

Słaby górny prążek (298 pz) identyfikuje produkt PCR amplifikowany z jednego celu w genomie. Jaśniejszy dolny prążek (238 pz) identyfikuje wielocelowy produkt PCR z 10 kopiami powtórzeń w tym samym genomie. Oba te regiony docelowe zawierają w 100% identyczne miejsca wiązania dla starterów.

Dlaczego w RAPD jest wiele pasm??

Ponieważ RAPD są generowane przez losowe przyłączanie przy użyciu 10-nukleotydowego startera, można oczekiwać, że po każdym użytym starterze będzie pewna liczba fragmentów. ... W zależności od tego, co porównujesz (mniej lub bardziej spokrewnione genetycznie), liczba prążków polimorficznych będzie się różnić.